антитела а э что значит у донора это
Антитела а э что значит у донора это
Это выявление антител к специфическому белку, находящемуся на поверхности эритроцитов, – резус-фактору. Данные антитела являются одной из основных причин гемолитической болезни новорождённых.
Титр антирезусных антител, непрямая реакция Кумбса.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Резус-фактор (Rh) передается по наследству, это белок на поверхности эритроцитов. Те люди, у которых он есть (а это большинство, около 85 %), называются резус-положительными. Однако у некоторых, резус-отрицательных, этот белок отсутствует. Отрицательный резус никак не влияет на здоровье самого человека. Однако у матери и ребенка, которого она вынашивает, могут возникнуть проблемы, если у них разные резус-факторы или если у матери развиваются антитела, которые реагируют с факторами клеток крови ребенка. Наиболее распространенный пример: женщина с негативным резус-фактором (Rh-) беременна ребенком с положительным резус-фактором (Rh+). Иммунная система этой женщины может выработать антитела против резус-положительного фактора крови ее ребенка. Несмотря на это первенец довольно редко бывает больным, потому что материнский иммунитет не вступает в контакт с кровью ребенка до самых родов. Однако антитела, выработанные при первой беременности, могут свободно проникать через плаценту при следующих беременностях и таким образом создавать проблемы резус-положительному ребенку.
Для уменьшения вероятности того, что у матери Rh- выработаются антитела на кровь ребенка Rh+, ей иногда назначают инъекции анти-D-гамма-глобулина за 28-34 недели до родов, а также в первое время после рождения резус-положительного ребенка. Могут потребоваться и дополнительные инъекции во время беременности, если возникнет подозрение на то, что кровь матери контактировала с кровью плода Rh+ (например, при пункции плодного пузыря или при травмах брюшной полости). Инъекция антитела очищает кровь ребенка от присутствующих антигенов и таким образом предотвращает реакцию на них материнской иммунной системы.
Для чего используется исследование?
Анализ на антирезусные антитела применяется главным образом для обнаружения антител на резус-фактор. Резус-отрицательная мать и резус-положительный отец могут зачать Rh+ ребенка, при этом есть вероятность, что некоторые эритроциты крови ребенка попадут в кровяное русло матери во время беременности и родов. В ответ на чужеродные эритроциты Rh+ организм матери вырабатывает антирезусные антитела. Они представляют собой угрозу для будущих детей этой матери. Каждая женщина до наступления беременности либо во время нее должна сдать анализ на резус-фактор. Он поможет определить, является ли ее кровь резус-отрицательной, а также выяснить, приобрела ли резус-отрицательная женщина антитела против эритроцитов Rh+. Беременная женщина, организм которой еще не образовал антирезусные антитела, для предотвращения их появления может воспользоваться инъекциями иммуноглобулина. Резус-отрицательной женщине при беременности следует пройти дополнительное лечение иммуноглобулинами сразу после любой ситуации, когда кровь плода могла попасть в ее кровяное русло. Анализ на антирезусные антитела помогает выявлять эти процессы и вовремя назначать и корректировать лечение для предотвращения резус-конфликта.
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Правильно проведенное лечение анти-D-гамма-глобулинами препятствует образованию антирезусных антител практически у всех беременных женщин с отрицательным резус-фактором. Однако такая профилактика не действует, если у женщины уже образовались антирезусные антитела.
СКРИНИНГ АНТИЭРИТРОЦИТАРНЫХ АНТИТЕЛ И ДРУГИЕ ПРАКТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ ИММУНОСЕРОЛОГИИ
Жибурт Е.Б., Попова В.И., Иванова И.В., Рейзман П.В.
Центр крови Минздрава России, Москва
В целях профилактики трансфузионных осложнений и аллоиммунизации рекомендуется практика определения антиэритроцитарных антител у доноров и использование тестов повышенной чувствительности для выявления очень слабых аллоантител [1, 3, 6].
Скрининг антиэритроцитарных аллоантител имеет важное клиническое значение для предупреждения развития гемолиза донорских эритроцитов, выявления аллосенсибилизированных лиц, профилактики гемолитической болезни новорожденных по антигенам системы группы крови Резус и антигенам других систем.
Методика гелевой технологии разработана Lapierre в 1990 году [1]. ID-гелевая система представляет собой пластиковые карты с микропробирками, заполненными гелем, к которому добавляются эритроциты и сыворотки. Пробирки с нейтральным гелем содержат модифицированный Sephadex с буфером и предназначены для скрининга антител. После центрифугирования в специальной центрифуге агглютинированные эритроциты задерживаются в верхних слоях геля, в то время как неагглютинированные эритроциты, беспрепятственно пройдя через гель, образуют осадок на дне пробирок. Положительные реакции наглядно отличаются от отрицательных, и могут быть разделены по силе реакции, как и при стандартных методах.
Материалы и методы
Для параллельного исследования сывороток применялись непрямая проба Кумбса в растворе низкой ионной силы (Liss-Coombs) для гелевой технологии (Diamed, Швейцария) и желатиновый метод с 10% раствором желатина (ФГУП «Мосхимфармпрепараты» имени Н.А.Семашко, Москва).
Результаты и обсуждение
Антиэритроцитарные антитела обнаружены 8 сыворотках доноров (1,4 %). Из них в желатиновом методе в 7 случаях наблюдался отрицательный результат.
Лишь в одном случае (донор Г. №8 АII Rh+) аллоантитела выявлены как желатиновым методом, так и гелевой технологией. Однако, чувствительность реакции при скрининге антител желатиновым методом (+) ниже, чем в гелевом тесте (++) (таблица 2).
Различия в распределении аллоиммунизации в зависимости от пола доноров и больных не выявлено (p>0,05).
Использование панели из трех эритроцитов в сочетании с информацией о фенотипе донора/пациента позволяет лишь предположить специфичность выявленных антиэритроцитарных антител. Для точной идентификации необходима расширенная панель эритроцитов.
Установлено, что гелевый тест является простым, быстрым и очень чувствительным методом, который сводит к минимуму ошибки, встречающиеся при использовании традиционных методик. Исследование гелевой технологией аллоантител к антигенам эритроцитов у доноров (не имеющих антител) проводят 1 раз в год [2], при отсутствии в анамнезе переливаний крови. У доноров-женщин репродуктивного возраста желательно проводить исследования антиэритроцитарных аллоантител не менее 2 раз в год.
При обнаружении нерегулярных тепловых антиэритроцитарных аллоантител все компоненты крови донора, за исключением отмытых эритроцитов, не должны быть использованы для переливания.
У больных необходимо исследовать наличие антиэритроцитарных аллоантител перед проведением каждой гемотрансфузии, и обязательно перед выпиской из стационара (через 15-30 дней после переливания эритроцитов) для определения сенсибилизации антигенами эритроцитов и дачи соответствующих рекомендаций. Если реципиенту была проведена даже одна трансфузия эритроцитсодержащих компонентов, то в последующем он попадает в группу «риска», т.к. в большинстве случаев, к сожалению, переливание проходит без типирования антигенов эритроцитов, и организм может быть сенсибилизирован отсутствующим у человека эритроцитарным антигеном. При повторном переливании донорских эритроцитов (попадании того же чужеродного антигена), возможен быстрый иммунный ответ с выработкой антиэритроцитарных аллоантител и развитием внесосудистого гемолиза.
Поиск антител после гемотрансфузии зачастую не проводится, поскольку не влияет на результат данной госпитализации и завершающегося лечения. Однако он весьма значим для последующей жизни пациента, поскольку спустя какое-то время антитела могут перестать выявляться, но сохранятся T-клетки «памяти». При необходимости переливания крови в будущем новый контакт с сенсибилизирующим антигеном будет сопровождаться бурным гуморальным иммунным ответом с возможной гемолитической трансфузионной реакцией.
В действующих документах Минздрава России нет единой точки зрения на обеспечение совместимости донора и реципиента по антигенам системы Келл (таблица 4). Серьезные проблемы создает неудачная формулировка [3] «В целях профилактики посттрансфузионных осложнений, обусловленных антигеном Келл, отделения и станции переливания крови выдают для переливания в клинику эритроцитную взвесь или массу, не содержащие этого фактора. Келл положительным реципиентам могут быть перелиты Келл положительные эритроциты». Очевидно, что первое предложение исключает второе, а значит, во-первых, ведет к уничтожению Келл-положительных эритроцитов (6-8 % всех заготовленных доз) и, во-вторых, увеличивает риск посттрансфузионного гемолиза, обусловленного антигеном k (Cellano).
При организации скрининга антиэритроцитарных антител, как и для решения многих других проблем современной трансфузионной медицины имеет важное значение оптимальное распределение ресурсов. Относительные затраты на одно исследование (амортизация оборудования, гелевые карты, панели стандартных эритроцитов) снижаются по мере увеличения количества исследований. Необходимо максимально централизовать иммуногематологические исследования, как это предусмотрено Концепцией развития службы крови в Российской Федерации в 2004-2010 годы [4].
Донор должен быть информирован о выявленных антителах. Эту информацию необходимо внести в индивидуальную медицинскую документацию и использовать при возможных переливаниях крови в будущем.
Выводы
1. Для скрининга антиэритроцитарных аллоантител оптимально использовать гелевый тест.
2. Целесообразно проводить поиск антиэритроцитарных антител спустя 2-4 недели после гемотрансфузии и сохранять данные об аллоиммунизации в медицинской документации пациента.
3. Целесообразно выносить на этикетку гемоконтейнера данные о фенотипе донора по системам групп крови Резус и Келл,
4. У Келл-положительных реципиентов оптимально использование Келл-положительных донорских эритроцитов.
5. Для индивидуального выбора донора крови в заявке на гемокомпоненты целесообразно указывать фенотип реципиента.
Литература
1. Жибурт Е.Б. Трансфузиология: учебник.- СПб: Питер, 2002.- 736 с.
2. Инструкция по предупреждению посттрансфузионных осложнений, обусловленных факторами Кеll и с(hr’) (утв. приказом Минздрава России от 9 января 1998 г. № 2)
3. Инструкция по применению компонентов крови (утв. приказом Минздрава России от 25 ноября 2002 г. № 363)
4. Решение Коллегии Минздрава РФ и Президиума Российской академии медицинских наук от 11 ноября 2003 г. «О Концепции развития службы крови в Российской Федерации» (протокол N 16)
5. Техническое руководство американской ассоциации банков крови/ Пер. с англ.- Милан: Европейская школа трансфузионной медицины, 2000.- 1035 с.
6. Требования к проведению иммуногематологических исследований доноров и реципиентов на СПК и в ЛПУ/ Методические указания Минздрава России от 11 апреля 2002 г. № 2001/109)
Фенотип антигенов эритроцитов и индекс сенсибилизации у доноров компонентов крови и пациентов г. Астаны
Ж.К. Буркитбаев, Р.Б. Меирбекова, Е.Н. Курганская, Л.Л. Карп, Р.З. Магзумова
Научно-производственный центр трансфузиологии, г. Астана, Казахстан
Трансфузиология №2, 2013
Резюме
В результате проведенного исследования установлено большое разнообразие фенотипов в системе Резус, а также достаточно высокая степень сенсибилизации у реципиентов и высокий индекс сенсибилизации населения города Астаны.
Ключевые слова: антигенный состав эритроцитов.
Введение
Исследование распространенности у доноров основных клинически значимых антигенов эритроцитов, определение индекса аллоиммунизации является непременным условием адекватной профилактики посттрансфузионных реакций и осложнений гемолитического типа. Определение группы крови, резус-принадлежности и типирование антигенов эритроцитов имеет большое значение при проведении гемотрансфузий для подбора совместимых пар донор-реципиент и профилактики наиболее опасных для жизни реципиентов посттрансфузионных осложнений гемолитического типа [1–16]. Методика агглютинации в геле была разработана с целью стандартизации реакций гемагглютинации и получения достоверных результатов. Тестирование на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента по антигенам эритроцитов не заменяет обязательное иммуногематологическое исследование, а лишь дополняет его. Использование гелевой системы позволяет также снизить риск заражения персонала даже при работе с потенциально инфицированными образцами [2]. Благодаря высокой чувствительности, стандартности и хорошей воспроизводимости результатов, методы агглютинации в геле получили широкое распространение [3].
Цель и задачи исследования
Целью работы явилось изучение частоты встречаемости антигенов эритроцитов и определение уровня сенсибилизации населения г. Астаны.
Материал и методы исследования
Материалом исследования служили 119882 образцов крови доноров и 6313 реципиентов за период 2010–2012 гг. Возраст доноров колебался от 18 до 60 лет. Средний возраст доноров составил 43,4±5,1 года. Возраст больных колебался от 0 до 77 лет. Средний возраст больных составил 37,9±9,5 года. Среди доноров было 64736 мужчин (54,0%) и 55146 – женщин (46,0%). Среди реципиентов мужчины составили 66,9%, женщины – 33,1%. Контингент обследованных пациентов: реципиенты, в анамнезе которых многократные трансфузии; беременные, входившие в группу риска по аллоиммунизации; дети с гемолитической болезнью новорожденных. Все образцы крови доноров исследовались на групповую принадлежность по системе АВО перекрестным методом с использованием моноклональных антител, стандартных эритроцитов, а также методом микроколоночной агглютинации с использованием кассет ORTHO BioVue. Образцы крови реципиентов исследовались на групповую принадлежность по системе АВО с применением гелевой методики Scangel. А нтиген D с истемы Р езус выявляли с помощью Цоликлона АнтиD Супер (ООО «Гематолог», Москва) и с применением метода микроколоночной агглютинации с использованием кассет ORTHO BioVue, дополнительно все RH(D)-отрицательные доноры (3464 из 119 тысяч) исследовались на наличие вариантных и слабых форм антигена D с помощью моноклональных антител анти-RH1(D)/ RhW1 в реакции Кумбса с применением гелевой методики Scangel (Карты Scangel Кумбс анти-IgG, C3d), «BioRad Laboratories», США). Все образцы крови доноров тестировались на наличие антигена К системы Кell с использованием моноклональных антител анти-К Супер (ООО «Гематолог», Москва) и с помощью метода микроколоночной агглютинации с использованием ORTHO BioVue анти-К. Все RH(D)-отрицательные доноры, а также «кадровые» RH(D)-положительные доноры были фенотипированы по антигенам С, с, Е, е системы Резус с использованием метода микроколоночной агглютинации с использованием кассет RH/K ORTHO BioVue, все реципиенты были фенотипированы по антигенам С, с, Е, е системы Резус с помощью гелевого метода с использованием карт Scangel Моноклональные RH/Kell производст- ва «Bio-Rad Laboratories», США. Во всех образцах крови доноров и реципиентов был проведен скрининг антиэритроцитарных аллоантител с помощью реакции Кумбса, выполненной с применением гелевой методики Scangel (Карты Scangel Кумбс анти-IgG, C3d), с эритроцитами Scangel I-II-III производства фирмы «Bio-Rad Laboratories», США-Франция). При положительных результатах скрининга проводилась идентификация анти- тел с эритроцитами ScanPanel из 10 линий клеток, «Bio-Rad laboratories», США.
Результаты и обсуждения
Нами было проанализировано распределение групп крови системы АВО у доноров и реципиентов (таблица 1).
Полученные данные свидетельствуют о том, что распределение групп крови по системе АВО у доноров и пациентов сходны. Преобладающими являются O и А группы крови. Выявленная нами частота встречаемости антигена А2 в группе крови А и АВ составляет для доноров 0,32%, а для пациентов 3,2%. Выявленное нами соотношение Rh(D)-положительных и Rh(D)-отрицательных лиц среди пациентов составило 94,39 и 5,6% соответственно. Для доноров это соотношение составило 92,43% Rh(D)-положительных и 7,57% Rh(D)-отрицательных (табл. 2).
Полученные нами данные выявили значительно больший процент антигена D вариантного у пациентов. Возможно, это является результатом ослабления антигена D при заболеваниях. Изучение антигенного состава эритроцитов кадровых доноров и пациентов показало, что наиболее распространенным фенотипом среди Rh(D)-положительных лиц является фенотип CCDee-, далее следуют фенотипы CcDee-, CcDEe- и ccDEe- (табл. 3).
Наибольшую опасность представляют в трансфузионном отношении гомозиготные сочетания антигенов системы Резус (СС, сc, ЕЕ и ее), которые встречаются у 86% резус-положительных (D+). Всем донорам и реципиентам независимо от групповой и резус- принадлежности предварительно проводился скрининг на наличие антиэритроцитарных антител. При оценке антиэритроцитарных антител у 13,3% пациентов обнаружены иммунные антитела различной специфичности. В связи с тем, что среди контингента обследованных в лаборатории лиц превалировали беременные, входившие в группу риска по аллоиммунизации, а также больные получившие многократные трансфузии, – индекс сенсибилизации у пациентов оказался высоким. Антитела к антигенам эритроцито системы Резус появляются в организме в результате трансфузий эритроцитов доноров, содержащих антигены, отсутствующие у реципиента, а также при иммунизации матери эритроцитами плода. Частота встречаемости аллоантител к антигенам эритроцитов системы Резус различна и определяется иммуногенностью антигена и частотой встречаемости в популяции. В 31% случаев антитела не идентифицировали, что связано с сочетанной специфичностью антител или наличием антител к широко распространенным в популяции антигенам. При изучении частоты аллосенсибилизации среди RH(D)-положительных и RH(D)-отрицательных лиц, было обнаружено, что RH(D)-отрицательные люди иммунизируются в 2–2,5 раза чаще, чем RH(D)-положительные. Антитела к минорным антигенам эритроцитов чаще встречаются у резус-положительных лиц, чем у резус-отрицательных. У доноров встречаемость аллоантител составила 0,46% (табл. 4).
Проблема гемолитической болезни новорожденных (ГБН) для города Астана актуальна. Наиболее часто ГБН развивается вследствие конфликта по антигенам системы Резус и АВ0 (табл. 5).
Иммуногематология – что это такое? Аллоиммунные антитела.
Каждый организм уникален по определенному набору признаков. Эти признаки называются антигенами. Двух одинаковых наборов антигенов в природе не существует (кроме однояйцевых близнецов). Антигены содержатся на любых клетках, в том числе, клетках крови. При попадании в организм «чужого» антигена, его распознает иммунная система и вырабатывает специфические белки – антитела, которые способны вступать во взаимодействие с антигеном и разрушать клетку, на которой он находится.
Иммуногематология – это учение об антигенах клеток крови и антителах к ним. Ее знание необходимо в определенных клинических ситуациях, когда происходит контакт человека с чужеродными антигенами других людей. Антигенную совместимость надо учитывать при переливании крови, при пересадке органов и тканей и при беременности, т.к. плод – это уникальный набор антигенов, отличный от материнского. Благодаря общему кровотоку происходит смешивание антигенов матери и ребенка и возникает иммунный конфликтов у обоих. Полный спектр антигенов клеток крови определить невозможно, поэтому мы учитываем только те антигены и антитела, клиническим значением которых пренебречь невозможно. И прежде всего это антигены эритроцитов, несовместимость по которым может стать причиной серьезных гемолитических осложнений в системе мать-плод или донор-реципиент.
Важным моментом в понимании процесса взаимодействия антигенов и антител крови человека является роль аллоиммунных антител, определение которых обязательно уже на этапе планирования беременности для определения прогноза ее течения. Полное название-аллоиммунные антиэритроцитарные антитела – образуются чаще всего к D-антигену эритроцитов, если этот антиген чужеродный. Другими словами, аллоиммунные антитела могут появиться в резус-отрицательном организме, если в него попали эритроциты резус-положительного донора. Такая ситуация возможна либо при переливании крови, либо при беременности резус-отрицательной женщины резус-положительным плодом. В случае с беременностью это называется резус-конфликтом и может закончиться выкидышем или развитием гемолитической болезни новорожденных. Первая встреча организма матери с резус-фактором плода и образование к нему аллоиммунных антител происходит на 7-8 неделе беременности. С этого момента антитела постепенно накапливаются. Риск несовместимости возрастает с каждой последующей беременностью резус-положительным плодом независимо от того, чем она закончилась. Если последующая беременность развивается с резус-отрицательным плодом, то несовместимость не развивается. Беременные с резус-отрицательной кровью наблюдаются на специальном учете в женской консультации и врач следит за динамикой нарастания у них антител. Первый раз анализ на антитела надо сдать с 8-20 неделю беременности, затем периодически проверять титр антител: 1 раз в месяц до 30-й недели, 2 раза в месяц до 36-й недели и 1 раз в неделю до 38-й недели. Проведение тестирования на аллоиммунные антиэритроцитарные антитела важно также при общей предоперационной подготовке, особенно для людей, которым ранее уже проводилось переливание крови. При таком грамотном подходе тяжелых последствий можно избежать.
Антитела к антигенам эритроцитов (систем Rh-hr, Kell, Duffy, Kidd, Lewis,P, MNS Luth., Xg) (скрининг)
Антигены эритроцитов человека являются структурными образованиями различной химической природы (протеины, гликопротеины или гликолипиды), расположенными на внешней поверхности мембраны эритроцитов. Антигены эритроцитов наследуются от родителей и в течение жизни не меняются. В настоящее время известно более 250 антигенов эритроцитов, которые распределяются в 29 генетически независимых системах.
Некоторые системы антигенов эритроцитов
Название
системы
Год открытия
Антигены систем
А1, А2, А3, А4, А5, А0, Az, B, 0, H
D, C, c, Cw, Cx, E, e, es (VS), Ew, Du, Cu, Eu, ce, Ces (V), Ce, CE, cE, Dw, Et LW
K, k, Kpa, Kpb, Jsa, Jsb
M, N, S, s, U, Мg, M1, М2, N2, Мc, Ма, Mv, Mk, Tm, Hu, He, Mia, Vw(Gr), Mur,
Hil, Vr, Ria, Sta, Mta, Cla, Nya, Sul, Sj, S2
Скрининг антиэритроцитарных антител имеет важное клиническое значение для предупреждения развития гемолиза эритроцитов, выявления аллосенсибилизированных лиц, профилактики гемолитической болезни новорожденных по антигенам системы Резус.
Гемолитическая болезнь плода (новорожденного) развивается тогда, когда женщина с резус-отрицательной кровью беременна плодом с резус-положительной кровью и при этом женщина уже была сенсибилизирована к резус-фактору. Из всех антител к антигенам системы Резус самую тяжелую гемолитическую болезнь плода (новорожденного) вызывают антитела к антигену D.
Обязательно необходимо исследовать наличие антиэритроцитарных аллоантител перед проведением каждой гемотрансфузии, и обязательно перед выпиской из стационара (через 15-30 дней после переливания эритроцитов) для определения сенсибилизации антигенами эритроцитов и дачи соответствующих рекомендаций. Если реципиенту была проведена даже одна трансфузия эритроцитсодержащих компонентов, то в последующем он попадает в группу «риска», т.к. в большинстве случаев, к сожалению, переливание проходит без типирования антигенов эритроцитов, и организм может быть сенсибилизирован отсутствующим у человека эритроцитарным антигеном. При повторном переливании донорских эритроцитов (попадании того же чужеродного антигена), возможен быстрый иммунный ответ с выработкой антиэритроцитарных аллоантител и развитием внесосудистого гемолиза.
Показания к назначению анализа: