морула на 5 день что это значит
Почему происходит остановка развития эмбрионов?
В чём причина остановки развития эмбрионов?
Существуют несколько причин по которым женщина не получает долгожданный перенос эмбрионов во время проведения протокола ЭКО, потому что прекращается процесс их деления. Статистика утверждает что 15-20% оплодотворенных яйцеклеток останавливаются в своем делении в процессе размножения на стадиях 3-4 клетки на вторые сутки. Останавливается деление яйцеклеток – по причине естественного процесса. Природный естественный отбор, позволяющий предотвратить зарождение плода с генетическим отклонением.
Современная эмбриологическая лаборатория в которой они культивируются оснащена специальным оборудованием, которое позволяет осуществлять процесс деления яйцеклетки с отработанной до мельчайших подробностей технологическими тонкостями.
Опираясь на прогрессивные технологии и высокотехнологичное оборудование обеспечивающее стабильные условия культивирования и развитие эмбриона после переноса, причину остановки в развитии и их делении следует рассматривать исключительно в плоскости жизнестойкости самого генетического материала.
Развитие эмбриона при ЭКО поэтапно дням:
Дата когда проводится пункция яичников и производится забор сперматозоида донора называется нулевой датой дня. Начало срока формирования плода начинается от момента смешивания сперматозоидов и ооцитов в специальной подготовленной специалистами среде. Результат зачатия возможно увидеть после 17 часов, с момента смешиваний мужской и женской гаметы. После 18 часов возможно рассмотреть в стадии зиготы – эмбрион с женскими или мужскими ядрами. Новый сформированный плод имеет диплоидный набор хромосомы и полученный от родителя индивидуальный генотип.
На 2 сутки нахождения плода в зиготе начинается его разделение, его клеточный состав называют бластомером, этих клеток в норме наблюдают по 2-4.
На 3 день он должен выделить шесть или восемь бластомеров. Это решающий этап создания зародышей: при обнаружении генетических дефектов, ход дальнейшего процесса останавливается, и он перестает существовать. Связывают это с тем, что в первичные часы после оплодотворения эмбрион питается питательным веществом и энергией материнской клетки, в следующие часы у него должен включиться собственный механизм жизнеобеспечения. Если он имеет генетический дефект, значит механизм не включается и он погибает.
На 4 сутки развития эмбриона при ЭКО у него сформировывается 10-16 бластомеров, процесс переходит в этап морула. В природе, находясь в организме женщины в этот период характеризуется попаданием эмбриона из маточного прохода в проход полости в матки. За четвёртые сутки образования морула сформировывается полостной объем, в котором клетка разделяется на одну и вторую группу. Когда полостное пространство заполняет большую половину клетки, процесс превращения морулы перетекает в стадию бластоцисты.
На 5-6 день развития эмбриона при ЭКО они совершенно сформированы, именно в этот период врачи репродуктологи культивируют плод в полость матки. Физиология искусственного состава среды не позволяет им выживать до 6 суток. Объем бластоцист равномерно расширяется, следовательно истончается ее оболочка. Возможен ее разрыв и ожидаемый выход плода, полностью сформированного для внедрения в слой эндометрия. Врачи это называют хетчингом. В варианте когда толщина оболочки чрезмерно толстая и плод не имеет возможности прорвать её сам, ему помогают это сделать. Эта процедура называется вспомогательный хетчинг. При помощи вспомогательного хэтчинга можно извлечь плоды с самым высоким качеством, и даже продиагностировать их генотип перед проведением имплантации.
На 7 день после проведения протокола ЭКО он помещается в слой эндометрия находящийся в полостном пространстве маточной трубы. Наружные клетки перестраиваются в плаценту, а внутренние в тело будущего ребёнка.
На 8 день наружные поверхностные ткани клетки формируют множество трубчатых ворсинок называемых трофобластомой. При помощи них обеспечивается питательная среда плода и начинает поступать кислород. В этом периоде формирования плод называют гаструлой.
На 9 сутки он все дальше перемещается в слой эндометрия. Начинается процесс переноса плода — имплантации. Возможно кровотечение из поврежденных ооцитов.
На 10 день заканчивается этап имплантации и начинается формирование плаценты. На 11 день плацентарные макрофаги уже синтезируют ХГЧ.
На 13-14 день ХГЧ попадая в кровь и концентрируясь в ней до достаточного уровня чтобы определить факт долгожданного зачатия.
Остановка эмбриогенеза при ЭКО, причины
Выше перечислены множественные причины остановки или неправильного формирования эмбриона после проведения ЭКО. Основным пунктом по мнению учёных генетиков всё же является проблема генетической аномалией. Она проявляется на стадиях зиготы, на 3 день, после переноса плода в слой эндометрия.
Замершая беременность. Причина остановки развития беременности
Наблюдаются случаи невынашиваемости беременными своего плода. Останавливается развитие плода в первых днях триместра. Это говорит об абсолютном физиологическом характере остановки. Причина кроется в искусственном отборе, связанном с решением материнского организма. Другими словами, биологический фактор женщины анализирует произошедшее оплодотворение, и если плод имеет дефект, то организм перестает подпитывать такую беременность. Он принимает решение о переносе и прекращении процесса развития плода и его отторжении, чтобы не расходовать силы своего биологического ресурса. Этим объясняется остановка развития эмбрионов.
В процессе оплодотворения может участвовать немалое количество плодоносных яйцеклеток которые могут иметь изъяны в хромосомном строении с самого начала своего формирования. Эти возможные эмбриональные дефекты трудно перенести и выявить на начальном этапе формирования эмбрионов, а тем более их подкорректировать в процессе. Всё это называется расплатой за излишек биологического разнообразия.
Репродуктологи наблюдают случаи когда остановка беременности происходит до имплантационного момента: интеллект женского организма не принимает данные сигнальных посылов о наступлении беременности. В жизни женщины наступает обычный месячный цикл, начинается менструация. Беременность не наступает.
3-ех или 5-ти дневные эмбрионы. В чем разница?
Перенос эмбрионов (ПЭ) — последний этап ЭКО. Если цикл был успешным, пациент увидит положительный тест на беременность уже через две недели. Выбор дня для переноса зависит от индивидуальных особенностей каждого пациента и программы ЭКО. Учитывая эти моменты, лечащий врач подберет наилучший момент для ПЭ.
При выборе срока переноса, врач должен учитывать два важных фактора:
Юридических ограничений в отношении количества переносимых бластоцист нет, но эксперты согласны с тем, что перенос одного эмбриона предотвращает многоплодную беременность, которая влечет риски как для самих детей, так и для будущей матери.
Что касается второго момента, то трансфер можно выполнить на любой стадии развития, с 1 по 7 день. Но лучше всего делать это на 3 или 5 день, когда можно наиболее точно оценить качество эмбрионов. Определение дня для ПЭ долго было спорным вопросом. Научные исследования показали, что эффективность процедуры не зависит от выбранного дня. Поэтому врачи, выбирая момент для ПЭ, делают ставку на индивидуальные особенности пациента.
Подробнее о развитие эмбрионов по дням читайте в этом материале — примеч. altravita-ivf.ru.
Перенос эмбрионов на 3 день
В естественных условиях зачатие происходит в маточных трубах женщины. После оплодотворения зародыш мигрирует в полость матки, где происходит его имплантация. В случае ЭКО эмбрионы культивируются в лаборатории. Учитывая тот факт, что искусственная среда отличается от естественной, экспертам нужно сократить длительность культивации на питательной среде. Это объясняет необходимость выполнения переноса на 3 день.
Эмбрион высокого (A) и низкого (D) качества
Преимущества и недостатки переноса на 3 день
Главное преимущество ПЭ на 3 день — наличие большего количества эмбрионов, готовых к трансферу. Кроме того, у пары, планирующей несколько детей, будет больше зародышей для криоконсервации. Во время культивации некоторые эмбрионы могут погибнуть или оказаться нежизнеспособными. Именно поэтому врачи рекомендуют поместить их в полость матки на стадии 6-8 клеток.
Перенос эмбрионов на 5 день
На 5 день культивирования эмбрионы становятся бластоцистами. Это несколько осложняет ситуацию, поскольку врачу придется уделить особое внимание их метаболическим потребностям, которые изменяются, начиная с 3 дня. Как и в случае с трехдневными, ПЭ имеет преимущества и недостатки.
Строение бластоцисты
Преимущества и недостатки переноса эмбрионов на 5 день
Главный плюс переноса на 5 день — это тот факт, что бластоцисты с самым высоким потенциалом выбирается естественным путем. Большинство оплодотворенных яйцеклеток с хромосомными аномалиями не могут дожить до 5-6 дня. Кроме того, предимплантационная морфологическая оценка более точна, если она проводится на 5 день. Следовательно, и выбор бластоцистов с наилучшим потенциалом более точен.
Перенос в стадии бластоцисты можно синхронизировать с циклом эндометрия. Помимо этого, в естественных условиях оплодотворенная яйцеклетка не прикрепляется к слизистой оболочке матки раннее 5 дня развития, то есть перенос в стадии бластоцисты более приближен к естественным условиям. И, наконец, риск развития при ПЭ на 5 день сопровождается минимальным риском развития многоплодной беременности.
Главный недостаток переноса на 5 день заключается в том, что даже в современных условиях не все эмбрионы могут дожить до стадии бластоциты. Согласно исследованиям, частота отмены процедуры выше в группе 5 дня, особенно при небольшом количестве яйцеклеток.
Преимущества индивидуального подхода
Независимо от мнения ученых о лучшем моменте для проведения ПЭ, эмбриологи и репродуктологи предпочитают решать этот вопрос индивидуально. Действительно, сделать конкретное обобщение в этом случае очень сложно, поэтому нужно рассматривать каждый случай отдельно.
К основным аспектам, которые определяют день переноса, относятся:
Если требуется предимплантационная диагностика, биопсию выполняют на 3 день. Расширенное культивирование также применяется при ЭКО с донорскими яйцеклетками, так как при этом обычно доступно большое количество зародышей хорошего качества. И, наконец, когда требуется тест ERA, ПЭ будет запланирован в наиболее подходящий момент, в зависимости от результатов теста.
Как принять решение
Данная статья не может быть использована для постановки диагноза, назначения лечения и не заменяет прием врача.
Оценка качества ооцитов и эмбрионов
Все пациенты интересуются качеством полученных клеток, а в дальнейшем и качеством эмбрионов. Однако данный вопрос многофакторный и не имеет однозначного ответа. Начнем с начала. Первый вопрос, который задают пациенты, когда к ним в палату после процедуры забора ооцитов приходит эмбриолог, звучит всегда одинаково: «А клетки у меня хорошие?». Хочется сразу заметить, что на этот вопрос очень сложно ответить на данном этапе программы ВРТ. Первичная оценка ооцита основана на непосредственном визуальном анализе морфологии ооцит-кумулюсного комплекса. При получении ооцитов эмбриолог смотрит на клетки через бинокулярный микроском с незначительным уровнем увеличения. Выглядит это вот так:
В данной ситуации оценить детально качество ооцитов не представляется возможным. Эмбриолог может только делать предположения. Поэтому оценка ооцитов на этапе проведения трансвагинальной пункции яичников не проводится.
После забора ооцитов эмбриолог определяется с тем, каким методом проводить оплодотворение полученных клеток.
Метод оплодотворения выбирается на основании показателей мужского материала. Если показатели спермограммы снижены – выбирается метод ICSI. Суть его заключается в том, что эмбриолог очищает ооциты от клеток кумулюса и с помощью специальных инструментов, работая на специальном микроскопе, вводит морофологически хороший, активно-подвижный сперматозоид внутрь клетки. Перед тем как ввести сперматозоид в клетку, его обездвиживают. Данный метод оплодотворения предлагается также парам с бесплодием неясного генеза и пациентам, планирующим проведение преимлантационной генетической диагностики. Помимого этого, ИКСИ может быть проведено по желанию пациента.
При хороших показателях спермограммы проводится оплодотворение методом ЭКО. В чашке со специальной средой соединяют сперматозоиды и ооциты, а оплодотворение происходит естественным способом.
Итак, поговорим более подробно о зрелости и качестве ооцита.
Созревание ооцита до состояния, когда он способен к оплодотворению, происходит в процессе стимуляции суперовуляции, проводимой врачом гинекологом-репродуктологом. Не все ооциты в процессе стимуляции достигают зрелости.
Зрелый ооцит выглядит так
При оплодотворении методом ЭКО такую оценку не проводят. Возможность оценить клетки в данной ситуации возникает только утром следующего дня, а в это время не всегда возможно понять, какими клетки были в момент пункции, т.к. они имеют возможность пройти процесс дозревания в условиях инкубатора.
Что такое качество ооцита
Качество ооцита характеризует внешний вид цитоплазмы, вителлинового слоя, полярного тельца. Гомогенная цитоплазма с однородным цветом и отсутствием гранулярности характеризует хорошее качество ооцита. Вакуоли, темная окраска, всевозможные включения, деформация или гранулярность расцениваются при морфологической оценке качества ооцита как негативные признаки.
Ооцит плохого качества, с гранулированной цитоплазмой и вакуолью большого размера в центре.
Оценка оплодотворения в стадии бластоцисты
Оценка оплодотворения проводится утром следующего за пункцией дня. Этот день считается 1-м днем эмбрионального развития.
Возможность понять, произошло ли оплодотворение клетки, появляется через 18 часов после оплодотвоерния и характеризуется формированием пронуклеусов. Эмбрион первых суток развития называется зиготой.
На этот день эмбриолог оценивает «правильность» оплодотворения. Нормально оплодотворившийся ооцит содержит 2 пронуклеуса. Все остальные варианты считаются отклонением.
Триплоидный эмбрион (3pn)
Аномально оплодотворившиеся эмбрионы исключаются из культивирования.
Оценка качества эмбрионов 2-3 дня развития
Начиная со вторых суток эмбрионального развития начинается фаза дробления.
Эмбрион хорошего качества выглядит так.
4-е сутки эмбрионального развития
На 4-е сутки развития эмбрион человека состоит уже, как правило, из 16-18 клеток, межклеточные контакты постепенно уплотняются, и поверхность эмбриона сглаживается. Этот процесс называется компактизацией. Важно понимать, что до 3-х суток дробление эмбриона происходит механически, каждая клетка делится пополам, черпая энергию из запасов ооцита. Начиная с 4 суток эмбрионального развития начинается дифференциация клеток эмбриона, часть из них сформируют зародыш, остальные будут обеспечивать возможность имплантации и формирования плаценты.
На данном этапе эмбрионы наиболее чувствительны к отрицательным воздействиям.
Качество бластоцисты, которая сформируется из морулы, оценить практически невозможно.
Оценка качества морулы проводится по характеристикам компактизации:
Морулы отличного качества
Морула плохого качества
Далее внутри морулы начинает формироваться полость. Когда эта полость достигает достигает 20% от ее объема, эмбрион называется бластоцистой. В норме формирование бластоцисты допускается с конца 4-х по середину 6-х суток развития, но чаще это происходит на 5-е сутки. В редких случаях возможно формирование бластоцисты к 7-м суткам эмбрионального развития.
Бластоциста состоит из двух популяций клеток, таких как: трофэктодерма (однослойный эпителий, окружающий полость) и внутренняя клеточная масса (плотное образование из клеток внутри бластоцисты). Из трофэктодермы сформируется в дальнейшем плацента и все зародошевые оболочки. Из внутренней клеточной массы будут формироваться все ткани и органы будущего ребенка. На данном этапе развития эмбрион оценивают по 3 критериям:по размеру полости, качеству трофэктодермы и качеству внутриклеточной массы.
Размер полости оценивают цифрой от 1-ого до 4-х. Внутриклеточную массу и трофэктодерму оценивают буквами от А до С. Первая буква в оценке качества будет относится к внутриклеточной массе, вторая – к качеству трофэктодермы. Если бластоциста успела совершить «хетчинг» (разрыв оболочки, окружающий эмбрион), такой бастоцисте присваивается цифра 5. Если же бластоциста успела полностью выбраться из оболочки после хетчинга, такую бластоцисту обозначат цифрой 6. Размер полости имеет меньшее значение в определении качества эмбриона, чем буквенная классификация. Ввиду того, что эмбрионы имеют индивидуальные особенности, они могут развиваться неравномерно. Любой размер полости определяется как вариант нормы. Буквенные обозначения следует понимать так: наивысшее качество оценивается буквой А, наихудший вариант развития внутриклеточной массы и трофэктодермы обозначается буквой С.
Важно понимать, что критерии оценки эмбрионов носят субъективный характер. Даже эмбрионы, оцененные по классификации как эбмрионы среднего и ниже среднего качества, могут дать полноценную беременность.
Оценка качества эмбрионов в программах ЭКО
Несмотря на то что результативность программ ЭКО зависит от множества факторов, главным и решающим этапом, практически определяющим успешность программы, является эмбриологический. А так как различные манипуляции с эмбрионом человека – это передний край современной науки, можете представить себе сложность терминологии, которую используют эмбриологи в своей повседневной деятельности. Ясности не добавляет и обилие различных классификаций и методов оценки качества используемых клеток.
Мы постараемся доступным языком объяснить, что подразумевается под непонятными сочетаниями букв и цифр и дать понимание того, на основе каких данных врачи принимают решения и дают прогнозы на исход программ ЭКО.
Главный эмбриолог, к.б.н.
Хотим сразу предупредить — ни в коем случае не стоит забывать, что для того, чтобы самостоятельно оценить перспективы и принять решение о переносе эмбриона нужно быть настоящим специалистом, имеющим помимо специального образования достаточный опыт.
В каждом конкретном случае решение и прогноз основывается на совокупности всех известных данных и чаще всего является коллективным решением врача и эмбриолога. Главная сложность состоит в том, что каждому этапу развития эмбриона соответствует своя система оценки качества и способ записи этой оценки. И для того чтобы понимать обозначения вроде «8с» необходимо хотя бы немного разобраться в содержании этих этапов и сопутствующих терминах.
День первый
На первом этапе эмбриолог оценивает признаки оплодотворения после проведенной процедуры ЭКО, ИКСИ, ИМСИ или PICSI. На этом этапе в эмбрионе оценивают наличие, количество, симметричность, внутреннее строение и внешний вид пронуклеусов.
Пронуклеусы — это ядра мужской и женской половых клеток еще не слившихся и несущих одинарный набор хромосом.
По их количеству и внешнему виду оценивают жизнеспособность эмбриона и перспективы возникновения патологий. В норме их должно быть два, они должны иметь относительно равные размеры, находиться рядом и иметь внутри «ядрышки» — пронуклеоли тоже в определенном количестве и расположенные определенным образом. На этом этапе может формироваться множество патологий, например, при присутствии только одного пронуклеуса оплодотворение и не сможет произойти, ведь именно это образование и есть носитель генетического материала, а без участия противоположного пола размножаться мы еще не научились. Пронуклеусов может оказаться и три. Такие эмбрионы часто несут аномальный, тройной набор хромосом и нежизнеспособны. Обычно они погибают до имплантации (прикрепления к стенке матки) или приводят к замершей беременности. Такие эмбрионы отбраковываются и не используются в программах ЭКО.
День второй
Вторые сутки знаменуются соединением ядер женской гаметы и мужской, а также процессом дробления зиготы, которая на этой стадии становится эмбрионом. Численность бластомеров (эмбриональных клеток) – 2–4, но их объем не увеличивается.
Дробление эмбрионов оценивается специалистом по таким критериям:
Уровень фрагментации и численность бластомеров классифицируется по типам следующим образом:
Самый качественный эмбрион — 4А, где 4 — количество бластомеров, А — отсутствие фрагментации.
Эмбрион на второй день
День третий
Продолжается дробление эмбриона, у которого насчитывается от 4 до 9 бластомеров. В начале третьего дня развития запускается собственная генетическая программа, которая в некоторых случаях содержит «опечатки». До этого эмбрион для своего роста «пользуется» веществами, накопленными яйцеклеткой во время ее созревания. Если эмбрион имеет мутации в программе («блок развития»), то далее он не развивается. Это происходит примерно в 20% случаях.
Причиной «блока развития» может быть низкокачественная семенная жидкость или яйцеклетка. Изначальное неудовлетворительное развитие эмбриона свидетельствует о проблемах с яйцеклеткой, если эмбрион «страдает» с третьих суток культивирования, то сперма была ненадлежащего качества. «Блок развития» – это так называемый естественный отбор, эволюционный спасительный механизм, который останавливает развитие некачественных эмбрионов. Как в дальнейшем будет развиваться и расти эмбрион зависит от сформированного генома и своевременности начала его функционирования.
Эмбрион на третий день
День четвертый
К этому сроку эмбрион содержит до восьми бластомер. Клетки контактируют значительно активнее, поверхность у эмбриона немного сглаживается. Культивирование эмбриона третьи сутки характеризуется началом такого процесса, как компактизация, когда границы эмбриональных клеток различить невозможно. Компактизация бывает частичная или полная. Если этот процесс произошел на второй день, то возможно эмбрион развивается неправильно, с отклонениями, что отображается в эмбриологическом протоколе. Готовится переход эмбриона в бластоцисту.
В моруле (трехдневный эмбрион) содержится до 16 бластомеров.
При естественном зачатии на этом сроке эмбрион транспортируется из фаллопиевых труб в матку. По окончании четвертых суток происходит кавитация, когда внутри эмбриона образуется пустота. В процессе эмбрионального роста за пределы зародышевой оболочки выходит определенное количество клеток. Эти клетки при необходимости генетического исследования забирают на анализ. Диагностику проводит эмбриолог на 5–6 сутки, прокалывая зародышевую оболочку. Биопсия абсолютно безопасна для эмбриона и не вредит его развитию. До получения диагностических данных эмбрионы криоконсервируют.
Результаты исследования напрямую повлияют на дальнейшую «судьбу» эмбриона, характеристики которого никак не меняются после размораживания. Современные безопасные технологии замораживания биоматериала позволили широко внедрить в различные программы ВРТ генетическую диагностику. На четвертый день оценка эмбриона малоинформативна, но его можно оценить по численности компактизированных клеток. Чем больше таких клеток, тем вероятнее эмбрион станет бластоцистой.
Оценивание компактизации происходит по классам:
Не во всех лабораториях происходит оценка по такому критерию.
Четвертый день развития. Стадия морулы
День пятый
На данном этапе, включающем период с конца четвертого до начала шестого дня, морула, полость которой составляет половину своего объема, становится бластоцистой, состоящей из двух типов клеток:
Ооцит окружен блестящей оболочкой плотной консистенции (Zona pellucida), выполняющей две функции: она препятствует проникновению в яйцеклетку более одного спермия и удерживает вместе бластомеры. По мере роста внутриэмбриональная полость расширяется, приводя к разрыву оболочки, в результате чего происходит выход бластоцисты или «хэтчинг» (вылупление). На этом этапе оценка эмбриона происходит по таким критериям:
Качество обозначается цифрами (1–5), количество — буквами (А-С).
На пятый день бластоцисты переносят в матку или замораживают. Бластоцисты оценивают по степени зрелости (бластуляция):
Шестой день развития. Стадия бластоцисты
Оценка эмбриобласта
Важнейший критерий внутриклеточной массы (ВКМ) – плотность, сгруппированность. Эмбрион считается более качественным, если отмечается высокая плотность ВКМ.
Критерии трофэктодермы – количество и маленький размер:
Степень приживаемости эмбрионов в полости матки оценивают спустя две недели по исследованию крови на ХГЧ. Более достоверная информация будет получена с помощью УЗ-диагностики через три недели. Вероятность наступления беременности зависит во многом от качества имплантированных эмбрионов. Морфологические данные, используемые для оценивания эмбрионов, являются необходимыми и основными, но этого не всегда достаточно. Иногда при переносе высококачественных эмбрионов они не имплантируются. В других случаях при переносе эмбрионов невысокого качества наступает беременность. Поэтому эмбриологи используют дополнительные варианты оценивания, позволяющие спрогнозировать имплантацию.
Развитие эмбрионов является сложным трудоемким процессом, в котором нужно учитывать массу тонких нюансов, что под силу только высокопрофессиональным специалистам. Если в ходе проведения программы ЭКО удалось довести 40% эмбрионов до этапа бластоцисты отличного качества, то программа считается успешной.
В этом плане криотехнологии, применяемые в протоколах ЭКО, неоценимы, поскольку есть возможность не только перенести в матку высококачественные эмбрионы, но и заморозить оставшиеся. Это преимущество позволяет использовать криозамороженный биоматериал при следующем переносе, минуя несколько небезопасных для здоровья и дорогостоящих этапов.
Данная статья не может быть использована для постановки диагноза, назначения лечения и не заменяет прием врача.