мокрота на пцр что это
Мокрота на пцр что это
Исследование для выявления возбудителя туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) микобактерии в образце биоматериала.
Туберкулез, микобактерии туберкулеза, палочка Коха.
Tuberculosis, Tubercle bacillus, Koch’s bacillus.
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Биоптат, венозную кровь, ликвор, мокроту, плевральную жидкость, первую порцию утренней мочи, эякулят.
Общая информация об исследовании
Туберкулез (от лат. tuberculum – «бугорок») – инфекционное заболевание человека и животных, передающееся преимущественно воздушно-капельным путем. Риск заразиться повышает подавление иммунитета, вызванное ВИЧ/СПИДом, диабетом, заболеванием почек, трансплантацией органов и применением иммуносупрессоров, беременностью, старением. Кроме того, наиболее подвержены ему те, кто контактирует с больными туберкулезом, а также дети до 5 лет после виража туберкулиновой пробы. К наиболее уязвимым группам населения относят бездомных, заключенных, мигрантов из стран с высокой заболеваемостью туберкулезом, наркопотребителей, а также пожилых людей.
Для данного исследования используется тест-система, основанная на выявлении геномной ДНК возбудителя туберкулеза с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени (реал-тайм ПЦР). В современной диагностике это один из самых быстрых, универсальных и высокочувствительных методов.
Стандартные способы обнаружения микобактерий туберкулеза базируются на выращивании патогенных микроорганизмов в питательной среде. Сложности связаны с низкой скоростью роста колоний Mycobacterium tuberculosis – необходимо ожидать до 1,5 месяцев после взятия материала.
Высокой чувствительностью и специфичностью обладают молекулярно-биологические методы, основанные на детекции генетического материала микобактерий туберкулеза. Их важнейшим преимуществом является высокая скорость получения результата. Использование ПЦР реал-тайм позволяет выявить возбудитель туберкулеза уже в день получения клинического образца.
Бактериемия (попадание в кровь пациента микобактерий) может возникать на ранних стадиях туберкулезной инфекции, а также при развитии генерализованного или внелегочного туберкулеза. Она опасна тем, что иммунный ответ на бактерии вызовет сепсис и септический шок, чреватый смертью. Риск развития генерализованного туберкулеза наиболее высок у пациентов с ВИЧ на поздних стадиях, у тех, кто прервал противотуберкулезную терапию, а также у не обратившихся вовремя за медицинской помощью при появлении симптомов туберкулеза.
Диагностика туберкулеза у ВИЧ-инфицированных затруднена из-за иммуносупрессированного состояния организма, что зачастую проявляется в ложноотрицательных результатах туберкулиновых реакций и микробиологических тестов. В связи с этим тестирование на Mycobacterium tuberculosis методом ПЦР реал-тайм имеет большое значение.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Что может влиять на результат?
Эффективная противотуберкулезная терапия со временем приводит к исчезновению микобактерий в клиническом материале.
Кто назначает исследование?
Врач общей практики, терапевт, фтизиатр, уролог, гинеколог, инфекционист.
Микобактерии, ДНК (Mycobacterium tuberculosis complex, ПЦР) мокрота, кач. в Москве
Исследование проводят для диагностики туберкулеза легких путем обнаружения генетического материала Mycobacterium tuberculosis в мокроте.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Микобактерии, ДНК (Mycobacterium tuberculosis complex, ПЦР) мокрота, кач.?
Подробное описание исследования
По данным ВОЗ, в 2017 году 10 миллионов человек заболели туберкулезом, 1.6 миллиона из них умерли от этой болезни.
Россия входит в число стран, где туберкулез наиболее распространен. Для снижения этого показателя принимаются меры по профилактике и своевременной диагностике: это позволило сократить число больных и носителей.
Основная сложность диагностики состоит в том, что инфицированный туберкулезом человек может долго не подозревать о своей болезни, пока его иммунная система сдерживает возбудителя – бактерию Mycobacterium tuberculosis. Это очень коварный микроорганизм, со множеством механизмов для защиты от иммунной системы и длительного скрытого выживания в организме и в окружающей среде.
На самом деле, Mycobacterium tuberculosis инфицировано около трети всего населения планеты, но клинически заболевание развивается лишь у немногих из них. Как правило, это те люди, чей иммунитет недостаточно сформирован или ослаблен: дети, пожилые люди, иммунокомпрометированные лица (ВИЧ-инфицированные). Либо те, кто находится в условиях недостаточной санитарии и больших скоплений людей в замкнутом пространстве.
Чаще всего Mycobacterium tuberculosis поражает легкие, поэтому возбудитель может быть обнаружен в мокроте. Микобактерия также может поражать, нервную и мочеполовую системы, кости и другие органы и ткани.
Источником инфекции является больной туберкулезом в открытой форме, который выделяет микобактерии в окружающую среду со слюной и с мокротой при кашле. Также существует закрытая форма: человек болен, но не выделяет микобактерий в окружающую срезу и не опасен для окружающих. Инфекция передается воздушно-капельным путем или от беременной женщины плоду еще в утробе, так как Mycobacterium tuberculosis может проникать прямо в кровоток.
Симптомами заболевания являются:
Если речь идет о легочной форме заболевания, симптомы могут включать:
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — метод исследования, позволяющий обнаружить ДНК возбудителя в биоматериале даже в небольшом количестве. Этот метод дает возможность обнаружить генетический материал микобактерий в мокроте, полученной от человека, больного туберкулезом легких в открытой форме (если он выделяет возбудителя в окружающую среду).
Микобактерии, ДНК (Mycobacterium tuberculosis complex, ПЦР) соскоб, кач. в Москве
Исследование проводят в целях диагностики туберкулеза легких. Методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в соскобе из зева устанавливают наличие генетического материала Mycobacterium tuberculosis.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Микобактерии, ДНК (Mycobacterium tuberculosis complex, ПЦР) соскоб, кач.?
Подробное описание исследования
Исследование направлено на диагностику туберкулеза дыхательных путей — мультисистемного заболевания с множеством проявлений, которое является наиболее распространенной причиной смертности от инфекционных заболеваний во всем мире. По данным ВОЗ, в 2015 году было зафиксировано 1,4 млн случаев смерти от туберкулеза, среди которых 0,4 млн человек имели ВИЧ.
Россия входит в число стран с наиболее высоким показателем распространенности туберкулеза, хотя в последние 10 лет в этом направлении наблюдается положительная тенденция: снижается число как новых случаев заражения, так и доля носителей из общего числа больных.
Как правило, данное заболевание поражает легкие (85% случаев), но может затрагивать и другие органы, в том числе кости. Источниками инфицирования являются больные люди с открытой формой заболевания — выделяющие возбудителя в окружающую среду со слюной.
Симптомами заболевания являются:
Если речь идет о легочной форме заболевания, симптомы могут включать:
При внелегочной форме симптомы будут зависеть от области поражения.
Mycobacterium tuberculosis complex — общее название близкородственных бактерий, которые являются возбудителями туберкулеза. Они имеют множество факторов патогенности, которые позволяют им долго выживать в окружающей среде и избегать иммунного ответа. Микобактерия туберкулеза является внтуриклеточным паразитом, тем самым, будучи поглощенной клетками иммунной системы, возбудитель инактивирует ферменты данных клеток, оставаясь жизнеспособной. Благодаря этим свойствам микобактерий туберкулез — достаточно опасное заболевание, особенно для людей с ослабленным иммунитетом. Заражение происходит, как правило, воздушно-капельным путем, когда инфицированный человек чихает или кашляет, в редких случаях для заражения достаточно даже разговора с больным. Также туберкулез может передаться даже от беременной женщины плоду еще в утробе.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — метод исследования, позволяющий обнаружить ДНК возбудителя в биоматериале даже в небольшом количестве. ПЦР на M. Tuberculosis, согласно международным клиническим рекомендациям, не является стандартом диагностики данного заболевания. Данный тест используется в качестве дополнительного. «Золотой стандарт»: Проба Манту, T-SPOT, диаскин или квантифероновый тест.
Микобактерии, ДНК (Mycobacterium tuberculosis complex, ПЦР) мокрота, кач. в Самаре
Исследование проводят для диагностики туберкулеза легких путем обнаружения генетического материала Mycobacterium tuberculosis в мокроте.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Микобактерии, ДНК (Mycobacterium tuberculosis complex, ПЦР) мокрота, кач.?
Подробное описание исследования
По данным ВОЗ, в 2017 году 10 миллионов человек заболели туберкулезом, 1.6 миллиона из них умерли от этой болезни.
Россия входит в число стран, где туберкулез наиболее распространен. Для снижения этого показателя принимаются меры по профилактике и своевременной диагностике: это позволило сократить число больных и носителей.
Основная сложность диагностики состоит в том, что инфицированный туберкулезом человек может долго не подозревать о своей болезни, пока его иммунная система сдерживает возбудителя – бактерию Mycobacterium tuberculosis. Это очень коварный микроорганизм, со множеством механизмов для защиты от иммунной системы и длительного скрытого выживания в организме и в окружающей среде.
На самом деле, Mycobacterium tuberculosis инфицировано около трети всего населения планеты, но клинически заболевание развивается лишь у немногих из них. Как правило, это те люди, чей иммунитет недостаточно сформирован или ослаблен: дети, пожилые люди, иммунокомпрометированные лица (ВИЧ-инфицированные). Либо те, кто находится в условиях недостаточной санитарии и больших скоплений людей в замкнутом пространстве.
Чаще всего Mycobacterium tuberculosis поражает легкие, поэтому возбудитель может быть обнаружен в мокроте. Микобактерия также может поражать, нервную и мочеполовую системы, кости и другие органы и ткани.
Источником инфекции является больной туберкулезом в открытой форме, который выделяет микобактерии в окружающую среду со слюной и с мокротой при кашле. Также существует закрытая форма: человек болен, но не выделяет микобактерий в окружающую срезу и не опасен для окружающих. Инфекция передается воздушно-капельным путем или от беременной женщины плоду еще в утробе, так как Mycobacterium tuberculosis может проникать прямо в кровоток.
Симптомами заболевания являются:
Если речь идет о легочной форме заболевания, симптомы могут включать:
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — метод исследования, позволяющий обнаружить ДНК возбудителя в биоматериале даже в небольшом количестве. Этот метод дает возможность обнаружить генетический материал микобактерий в мокроте, полученной от человека, больного туберкулезом легких в открытой форме (если он выделяет возбудителя в окружающую среду).
«Методы исследования мокроты на туберкулез»
Мокрота является секретом, выделяющимся при воспалении трахеи, бронхов и легких. Ее появление отмечается не только при поражении дыхательных органов, но и при нарушениях сердца и сосудов. Методы исследования мокроты подразумевают макроскопическое, химическое и микроскопическое определение ее характеристик.
Что выявляет анализ
Исследование мокроты дает возможность обнаружить микроорганизмы, вызывающие патологический процесс, обозначить наличие микобактерии при туберкулезе, выявить раковые клетки, кровяные и гнойные примеси, а также определить резистентность бактерий к антибиотикам.
При каких состояниях показан анализ
Исследование мокроты на общий анализ проводится при следующих состояниях:
Подготовка к исследованию
Слизь будет лучше выделяться, если накануне перед сдачей анализа принять средство для отхаркивания или же употребить большое количество теплого питья. Перед сбором рекомендуется почистить зубы и ротовую полость, прополоскав ее теплой вскипяченной водой.
Основные правила сбора
Сбор мокроты на бактериологическое исследование желательно производить в утренние часы (она скапливается за ночь до приема пищи) в стерильный контейнер, который выдается лабораторией. Для анализа достаточно количества 5 мл. Анализ секрета производится не позднее, чем через 2 часа после его сбора. До момента отправки на исследование контейнер с содержимым должен храниться закрытым в холодильнике.
Количество мокроты при разных заболеваниях
Количество выделяемого секрета разнится в зависимости от характера патологического процесса. Обычно оно варьируется от нескольких плевков до 1 л за сутки. Малое количество выделяется при воспалении бронхов, застойных процессах легких и при начале приступа бронхиальной астмы. В конце приступа объем возрастает. Он может составлять до 0,5 л, а также выделяться в большом количестве, если имеется отек легких.
Много слизи выделяется при гнойном процессе в легких при сообщении с бронхами, при нагноении, бронхоэктазе и гангрене.
Исследование мокроты на туберкулез показывает распад тканей легких. В особенности такой процесс провоцирует каверна, которая сообщается с бронхами.
С чем связано уменьшение или увеличение выделения секрета
Увеличение количества выделяемого секрета может быть сопряжено с ухудшением состояния пациента и наблюдаться в период обострения. Увеличение может относиться и к положительной динамике развития болезни.
Уменьшение количества выделяемой слизи может свидетельствовать о регрессе воспаления или же нарушении в области дренирования полости, наполненной гноем. При этом отмечается ухудшение самочувствия больного.
Слизистый секрет выделяется при бронхитах в острой или хронической форме, бронхиальной астме, пневмонии, онкологической опухоли легкого, бронхоэктатической болезни, эхинококкозе легкого, сопровождающемся нагноением, актиномикозе.
Мокрота с примесью гноя наблюдается при абсцессе легкого, эхинококкозе и бронхоэктатической болезни.
Слизь с примесью крови или же состоящая полностью из крови присуща туберкулезу. Появление крови может свидетельствовать о наличии онкологии, бронхоэктатической болезни, нагноении легкого. Также такое явление наблюдается при синдроме средней доли, инфаркте в легком, травме, актиномикозе и сифилитическом поражении. Кровь может выделяться и при крупозном и очаговом воспалении легких, застойных процессах, сердечной астме и отечности легких.
Серозная мокрота отмечается при отечности легких.
Исследование мокроты выявляет ее различную окрашенность. Слизистые и серозные выделения не обладают цветом или же имеют беловатый оттенок.
Присоединение гноя придает секрету зеленоватый оттенок, что характеризует такие патологические процессы, как абсцесс легкого, гангрена, бронхоэктатическая болезнь, актиномикоз легкого.
Выделения с оттенком ржавчины или коричневого цвета указывают на то, что в них содержится не свежая кровь, а продукт ее распада — гематин. Такой секрет может выделяться при крупозном воспалении легких, сибирской язве, инфаркте легкого.
Зеленоватый цвет с примесью грязи или же желтый секрет свидетельствует о патологии органов дыхания в сочетании с желтухой.
В ярко-желтый цвет мокрота окрашивается при эозинофильной пневмонии.
Слизь цвета охры встречается при сидерозе легкого.
Черноватый или сероватый секрет отмечается при наличии примеси пыли от угля. При отеке легких серозная мокрота наблюдается в большом количестве. Как правило, она окрашена равномерно в розоватый цвет, что объясняется наличием эритроцитов. Такие выделения похожи на жидкий клюквенный морс.
Окрашиваться секрет может и от некоторых лекарственных препаратов. К примеру, антибиотик «Рифампицин» может придать ему красный цвет.
О характере патологического процесса в органах дыхания может свидетельствовать и запах секрета. Мокрота отдает запахом гнили при гангрене легкого или гнилостном поражении бронхов, онкологических новообразованиях, осложнившемся некрозе бронхоэктатической болезни.
Зачастую исследование выделений выявляет наличие слоев. При застойном характере мокрота с примесью гноя наблюдается при нагноении легкого и бронхоэктатической болезни.
Секрет с примесью гнили содержит в себе три слоя. Верхний слой похож на пену, средний серозный, а нижний с примесью гноя. Такой состав характеризует гангрену легкого.
Примесь пищи может отмечаться при наличии злокачественной опухоли в пищеводе при сообщении его с бронхами и трахеей. При попадании эхинококка в бронхи в мокроте могут быть обнаружены крючья или сколекс паразита. Очень редко обнаруживаются взрослые особи аскарид, которые проникают в органы дыхания у ослабленных людей.
Яйца легочной двуустки появляются при разрыве кисты, которая образуется в легких при наличии паразитов.
Гангрена и нагноение легких вызывают появление кусочков некрозов легких. При опухоли в выделениях могут присутствовать их фрагменты.
Свертки, содержащие фибрин, встречаются у пациентов с фибринозным бронхитом, туберкулезом и пневмонией.
Рисовые тельца, или линзы Коха, присущи туберкулезу.
Пробки Дитриха, включающие в себя продукты распада бактерий и ткани легких клеток жирных кислот, встречаются при гнилостном бронхите или же гангрене легкого.
Хроническая форма тонзиллита предполагает выделение из миндалин пробок, схожих с пробками Дитриха.
Исследование мокроты химическим способом предполагает определение:
Цитологический метод исследования секрета
Для дифференциальной диагностики туберкулеза и многих других поражений легких широко применяется цитологический способ, который включает два этапа: клиническое и микроскопическое исследование мокроты.
Клиническое исследование помогает определить, каким методом должен быть собран материал для получения правильного результата анализа.
Существует два основных вида материала, которых требует микроскопическое исследование мокроты: спонтанный и редуцированный. Второй вид секрета получают воздействием разнообразных раздражителей (средства для отхаркивания, ингаляции и т. д.).
Материал, полученный при игловой биопсии
Цитологическое исследование мокроты предполагает изучение макроскопического и микроскопического анализа ее клеток.
Больше всего информации для цитологического анализа несет мокрота, взятая утром на голодный желудок. До исследования она должна храниться не больше 4 часов.
Сбор мокроты для исследования бактериоскопическим методом подразумевает анализ секрета на предмет обнаружения в нем микобактерий, характерных для туберкулеза. Они похожи на тонкие, утолщенные по бокам или же посередине кривые палочки разной длины, которые располагаются как поодиночке, так и группами.
Обнаружение микобактерии туберкулеза не является доминантным признаком для диагностики и требует подтверждения бактериологическим способом. Туберкулезные микобактерии при норме в секрете не обнаруживаются.
Основой для анализа служат гнойные частицы, которые берутся из сорока шести различных областей и тщательно растираются до однородной массы двумя стеклами. Далее они сушатся на воздухе и фиксируются пламенем горелки.
Бактериологическое исследование мокроты методом Циля-Нильсена предполагает ее окрашивание в красный цвет. При этом все частицы секрета, за исключением микобактерии, приобретают синий оттенок, а микобактерии приобретают красный цвет.
При подозрении на поражение организма туберкулезом после трехкратного исследования на наличие микобактерий с отрицательным ответом прибегают к применению метода флотации (анализ Поттенджера).
Обычный способ исследования окрашенного мазка на МТБ дает положительный результат только при количестве МТБ не менее 50 000 единиц в 1 мл мокроты. По числу микобактерий судить о наличии туберкулеза нельзя.
Бактериоскопия пациентов с неспецифическими заболеваниями легких
Лабораторные исследования мокроты при наличии неспецифических заболеваний легких при бактериоскопии могут выявить следующие бактерии:
Автор: Сейтимова Молдир
Областной противотуберкулезный диспансер